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戴安离子色谱的重要部件就是分离柱

更新时间:2019-05-15      点击次数:1888
   戴安离子色谱是液相色谱的一种,主要用于阴离子、阳离子的分析。对难以用其他仪器和方法分析的常见阴离子、阳离子、有机酸和有机胺类等组分的分析,离子色谱法也具有选择性好,灵敏、快速、简便,同时测定多组分的优点。
  戴安离子色谱的重要的部件是分离柱。柱管材料应是惰性的,一般均在室温下使用。分离柱的填料由基质和功能基两部分组成。作为填料的基质可分为有机聚合物基质和无机(硅胶、氧化铝)基质两大类。其中有机聚合物离子交换树脂应用较广,是目前商品化分离柱的主要填料。高性能分离柱的有效性,是离子色谱发展的关键。
  戴安离子色谱柱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团, 这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。如果流动相中存在其他带相反电荷的离子,按照质量作用定律,这些离子将与结合在固定相上的反离子进行交换。
  戴安离子色谱柱基本原理:
  戴安离子色谱柱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法,其原理是指被分离物质所带的电荷可与离子交换剂所带的相反电荷结合,这种带电分子与固定相之间的结合作用是可逆的,在改变pH或者用逐渐增加离子强度的缓冲液洗脱时,离子交换剂上结合的物质可与洗脱液中的离子发生交换而被洗脱到溶液中。由于不同物质的电荷不同,其与离子交换剂的结合能力也不同,所以被洗脱到溶液中的顺序也不同,从而被分离出来。
  戴安离子色谱柱的再生方法有两种:
  (1) 先用25ml蒸馏水通过柱子以除去缓冲盐类,再用25ml甲醇冲洗,以除去由于分配效应而残存在骨架中的杂质,再用25ml 蒸馏水除去不溶于甲醇的残存盐类,后用缓冲液平衡。
  (2) 先用0.1mol/L的柠檬酸洗涤,然后用水洗涤(不要用碱性溶液,以防硅胶基质溶解),后用缓冲液平衡。

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