离子排阻色谱分离测定的是低电离度的分子而不是离子,分离在离子交换柱上实现。它的理论基础是说明离子通过膜扩散的Donna平衡,其主要论点是离子交换剂上大体积不扩散离子可排斥同电荷小离子扩散进入该相。
由于阳离子和阴离子交换剂排阻离子,使快速通过色谱柱,无保留或保留值很小;而非离子性溶质被分布、保留并实现分离。其保留基于溶质分子与交换剂之间范德华力、偶极、疏水作用等。有机酸同系物保留值随碳数增加;具相同碳数长链脂肪酸保留值随羧基增加而降低;芳环衍生物比同碳数脂肪族化合物保留值要高。
排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱,是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同,以使组分分离。常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等,可根据载体和试样的性质,选用水或有机溶剂为流动相。
离子排阻色谱与离子交换色谱在装置上没有什么区别。固定相是通常的磺化S—DVB阳离子交换树脂。树脂中二乙烯基苯的含量影响弱酸的保留,一般而言,交联度越低,就有越多的电解质进入到树脂内部,使弱酸的保留增强。