高效液相色谱柱的键合基质分为硅胶基质、聚合物基质等,其中硅胶基质应用较为广泛,其特点主要包括以下3方面:
(1)低pH值,硅胶键合键容易水解(pH<2);高pH值,硅胶容易溶解(pH>8)。
(2)在接近中性的条件时,硅醇基裸露,显酸性,不适宜分离碱性化合物。
(3)某些硅胶被一定金属污染,这些金属会引起峰的不对称或拖尾,甚至化合物的死吸附。
高效液相色谱柱的硅胶基质可分为全多孔硅胶微粒、杂化硅胶颗粒和实心核硅胶颗粒。
1、全多孔硅胶基质:全多孔硅胶,以其全多孔的结构特点具有很高的比表面积,故具有很高的柱效。其机械强度大的特点可保证填充床长时间在很高的操作压力下工作,柱效保持稳定,同时刚性、高强度的微粒还使柱子的反压较低,寿命较长。
2、杂化硅胶颗粒基质:为改善纯硅胶基质的不足,杂化硅胶颗粒应运而生,具有高稳定性、耐受pH及高机械强度的特性,能够改善高pH值条件下硅胶内部水解的问题。
3、实心核硅胶颗粒基质:实心核颗粒,即表面多孔实心核颗粒,与全多孔硅胶比较,由于颗粒密度大、颗粒大小分布窄,传质阻抗、涡流扩散降至低,从而柱效较高,峰容易过载,多次进样后柱压升高。