拿到手一个新的
赛默飞离子色谱柱,我们首先就要做一下这个色谱柱的柱效。关于柱效的很多人并不明白,主要有以下几个方面的问题,下面我们为大家做下简单解答。
一、什么是赛默飞离子色谱柱的柱效?
二、柱效下降会有什么现象?
三、柱效下降后如何来提高柱效。
1、什么是柱效?
柱效是指色谱柱保留某一化合物而不使其扩散的能力。柱效能是一支色谱柱得到窄谱带和改善分离的相对能力。
柱效,从名字上理解是色谱柱的分离效果。色谱柱的有效塔板数越大或有效的塔板高度越低,色谱柱的柱效越好,类似于每个塔板的分离效率相同,有效塔板数越多,终得到的质越纯。
柱效率是指溶质通过色谱柱之后其区域宽度增加了多少,它与溶质在两相中的扩散及传质情况有关,这是所谓色谱的动力学过程。
2、
赛默飞离子色谱柱的柱效下降会有什么现象?
1.看峰分离度,分离度直接关系测试结果准确性,可以判断柱效是否下降,柱效下降分离度一般会变差。
2.测定色谱柱的塔板数来判断
3.通过压力变化和出峰时间来判断,一般柱效下降时伴随着柱压的升高和降低,此时出峰的时间也会和之前有很大差异。
4.还可以根据新的柱子的保留时间判断,看重复性,平行性如何.
5.通过谱图峰型的变化,是否有严重前伸和拖尾现象,如果峰型很差了,柱效已经下降了
3、赛默飞离子色谱柱的柱效下降后如何来提高柱效。
赛默飞离子色谱柱长时间在缓冲溶液中使用和进样,将导致色谱柱离子交换能力下降,.用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生,反之,用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生.另外,还可以选择能溶解柱内污染物的溶剂为流动相做正方向和反方向冲洗.但再生后的色谱柱柱效是不可能恢复到新柱的水平的.如果柱子装反了,可以调回来,但可能会造成柱内担体塌陷.在不得已的情况下尽量不要反装色谱柱。