高效液相色谱柱以乙烯醇共聚物为基质的色谱柱，即使其载炭量很高也能保持表面的湿润。多孔结构具有足够大的平均孔径，对小分子化合物、多肽和小分子蛋白能够产生理想的分离效果。在有机溶剂比例较高的流动相中，该柱具有与硅胶基质色谱柱相同的柱效，但在碱性缓冲溶液为流动相条件下，其分离效率则超过硅胶色谱柱。显著的特点之一是基质被烷基化的填料的洗脱顺序，其保留能力与碳链长度成正比。高效液相色谱柱堵塞要怎么办?如果是遇到堵塞的情况，先要确定堵塞是由于什么原因引起的，如果是由于色谱柱中残留的缓冲盐...

今天小编给大家讲讲高效液相色谱柱峰形拖尾的9个原因：1.色谱柱物理损坏色谱柱有物理损坏是造成峰形拖尾的根源，解决方法就是更换新柱。2.色谱柱内填料污染流动相和样品中的杂质是色谱柱主要污染源。流动相所用的各种溶剂至少是分析纯，尽量使用色谱纯试剂。流动相所用的水要是超纯水或全玻璃器皿双蒸水。用前先用0.45um溶剂微孔过滤(器)过滤，除去可能存在的微粒。流动相建议现用现配，对于含盐的溶液尤其注意长置会产生细菌或出现沉淀。此外还得保证储存流动相的容器清洁。复杂样品可选用0.45um...

高效液相色谱柱是由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管的材质有很多，比如聚合物、玻璃、不锈钢等。但是建议柱管用不锈钢材质，因为不锈钢这种金属耐高压、耐腐蚀且硬度高，相比于玻璃等材质不易摔坏。不过当压力不高于70Kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管。对于色谱柱柱管内壁要求有很高的光洁度，不锈钢柱内壁会经过多次抛光，这是为提高柱效，减小管壁效应。0.1μm高光洁度色谱柱柱管能够快速分析的同时保持超高的柱效;使用寿命长，不仅能够减少频繁更换色谱柱带来...

高效液相色谱柱是色谱分离的核心。一支合适，稳定，高效的色谱柱对建立普适性强，重现性好的方法是不可少的。因色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说是柱效的下降。此时需要对色谱柱进行再生：(1)反相柱的再生，采用以甲醇:水=90:10(V/V),纯甲醇，异丙醇，二氯甲烷等溶剂作流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱的量为20~30倍色谱柱体积然后再以相反顺序冲洗色谱柱。(2)正相柱再生。顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲...

高效液相色谱柱性能影响因素有很多，例如，硅胶纯度、色谱柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积、孔径，化学性质包括键合类型、碳覆盖率、封端，在选择高效液相色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。1.样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。2.如果样品极性太强，或酸性太强;可以选择CN，NH2，或硅胶柱，HILIC(亲水色谱)，也有使用C18+强阴离子对试剂...

高效液相色谱柱的键合基质分为硅胶基质、聚合物基质等，其中硅胶基质应用较为广泛，其特点主要包括以下3方面：(1)低pH值，硅胶键合键容易水解(pH8)。(2)在接近中性的条件时，硅醇基裸露，显酸性，不适宜分离碱性化合物。(3)某些硅胶被一定金属污染，这些金属会引起峰的不对称或拖尾，甚至化合物的死吸附。高效液相色谱柱的硅胶基质可分为全多孔硅胶微粒、杂化硅胶颗粒和实心核硅胶颗粒。1、全多孔硅胶基质：全多孔硅胶，以其全多孔的结构特点具有很高的比表面积，故具有很高的柱效。其机械强度大的...

反相色谱是迄今在高效液相色谱中应用*泛的技术，主要是因为它适用于分析绝大多数的非极性物质和很多的可离子化的及离子化合物。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的，利用简单的清洗步骤来除去这些污染物往往就能恢复其色谱性能。经过等度运行后的高效液相色谱柱，有时用90～100%含量的溶剂B(双溶剂反相系统中洗脱能力较强的溶剂，如甲醇、乙晴、四氢呋喃等)冲洗20个柱体积可以清除污染物(色谱柱的柱体积和空柱管体积概念不同，一根4.6x250mm柱子的柱体积只有2.5ml，2.1x...