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  • 2021

    7-19

    液相色谱柱是液相色谱分离能力的核心部分,其化学性质参数包括以下几个方面:1、硅胶基质硅胶基质是通用的基质,强度大,化学修饰容易,但使用的pH值范围有限(一般为2—8,特殊修饰的可以达到1—12)。2、聚合物基质聚合物基质多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化学稳定,应用pH范围宽,具有更强的疏水性,对蛋白质等样品分离效果较好;但强度较小,有机溶剂可能导致聚合物溶胀而受损,批次重复性较差,商品化色谱柱不多,一般价格较贵。3、载碳量载碳量是基质表面键合相的比例,载碳量高,则...

  • 2021

    7-14

    离子色谱柱是一种用来改善在反相色谱中保留较差的强极性物质保留行为的色谱技术。它通过采用强极性固定性,并且结合高比例有机相/低比例水相组成的流动相来实现这一目的。而这样的流动相组成尤其有利于提高电喷雾离子化质谱的灵敏度。离子色谱柱的分离机制:分离机理在目前还存在着争议,主要包括以下三个方面:(1)分配机理(2)离子交换(3)偶极-偶极相互作用。更多的试验现象则表明HILIC色谱柱的保留机理包含氢键作用、偶极作用和静电作用等多种次级效应,很难将其区分开来。影响离子色谱柱保留的主要...

  • 2021

    7-12

    色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行,只有这样,测得的结果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。样品的前处理过程:(1)最好使用流动相溶解样品。(2)使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。(3)使用0.45μm或0.22μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。实际使用中,液相色谱柱有可能会失效,常见的原因有:1、色谱柱...

  • 2021

    7-6

    使用高效液相色谱柱做HPLC分析时,通常会遇到色谱柱柱压过高等情况,色谱柱柱压过高原因何在?怎么解决呢?高效液相色谱柱柱压高原因与解决方法:色谱柱柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因:1、拆去保护柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查2、把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查3、将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱...

  • 2021

    7-5

    液相色谱柱流动相的配制和流速的选择1、流动相的配制液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:(1)流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。(2)流动相与样品不产生化学反应(3)流动相的黏度要尽量小,以便得到好的分离效果;降低柱压降,延长泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。(4)流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器,最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制...

  • 2021

    6-28

    气相色谱柱在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。它除用于定量和定性分析外,还能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。气相色谱柱柱温的选择:柱温是影响分析时间和分离度的重要因素。选择柱温的依据是样品的沸点范围,固定液的配比,允许使用温度,以及检测器的灵敏度。柱温主要影响分配系数、容量因子以及组分在流动相和固定相中的扩散系数,从而影响分离度和分析时间。选择温柱的原则,一般是在使难分离物质对达到要求的分离度条件下,尽可能采...

  • 2021

    6-23

    液相色谱柱是液相色谱分离能力的核心部分,其规格有哪些呢?按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm,柱长10~30cm;②窄径柱(narrowbore),内径1~2mm,柱长10~20cm;③毛细管柱(又称微柱microcolumn),内径0.2~0.5mm;④半制备柱,内径>5mm;⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱长10~30cm;⑥生产制备柱内径可达几十厘米。液相色谱柱的一些注意事项:1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动温度的突然变化...

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